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兰伯艾克斯|二氧化碳培养箱:细胞培养小科普

更新时间:2023-07-17      点击次数:436


二氧化碳培养箱:细胞培养小科普


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大家有没有试过,把培养基冻起来,颜色会有变化吗?颜色一开始变黄!解冻以后,又会慢慢变红!为什么呢?


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如果冻的液体是水,或是缓冲液,颜色会有变化吗?

并不会有变化!


原因是因为,培养基中会加入酸碱指示剂,例如酚红,用于检测培养基的酸碱性。当培养基酸性增加时,酚红会呈现黄色,当培养基碱性增加时,酚红会呈现红色。


在细胞培养过程中,细胞代谢会产生酸性代谢产物,使培养基酸性增加,因此培养基会逐渐变黄。当培养基解冻后,酸性代谢产物逐渐消耗,培养基的酸性减少,导致酚红颜色逐渐变回红色。


如果冻结的液体是水或缓冲液,一般不会出现颜色的变化。这是因为水和缓冲液不含有酸碱指示剂,所以当其冻结和解冻时,颜色不会发生变化。


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为什么细胞培养基冷冻以后,会变酸呢?


细胞培养基冻结后变酸的原因是由于冰冻过程中,液体中的二氧化碳和其他气体会逸出。冰结过程中,水分子会有序排列形成晶体,气体无法溶解在冰中,因此逸出。培养基中二氧化碳的减少会导致酸碱度的变化,使培养基变酸,从而导致培养基的颜色变黄。


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培养箱的CO2浓度为什么要设置5%?


培养箱的CO2浓度设置为5%是为了模拟细胞/组织在生物体内的生长环境,并提供适合细胞体外培养的条件。培养箱要求稳定的温度、CO2水平、酸碱度和湿度,其中CO2浓度的稳定性对细胞培养非常重要。


以常用的细胞培养基DMEM为例,其碳酸氢钠浓度为1.5g/L。厂家已经测试好对应的培养箱浓度在5%左右,假如该培养基碳酸氢钠浓度变为3g/L,则培养箱CO2浓度应维持在10%。


国外常用的培养条件就是,1升培养基里含3克NaCO3,CO2培养箱的浓度是10%。而国内大多数是5%的浓度,相对应的培养基内碳酸氢钠浓度就在1.5g/L左右。



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